ДОКЛАДЫ АКАДЕМИИ НАУК
ВЫСШЕЙ ШКОЛЫ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Предложен метод экспериментального определения функции рассеяния точки в установке компьютерной цитофотометрии, основанный на обработке цифрового 16-битового изображения тест-объекта. Анализируются требования к цифровой камере и тест-объекту. Тестирование передаточной характеристики камеры выполняется с помощью аттестованного 9-ступенчатого ослабителя. Показано, что при комнатной температуре цифровая камера повышенной дигитализации позволяет регистрировать два кольца двумерной ФРТ оптической сиcтемы микроскопа на линейном участке передаточной характеристики камеры. Cпециализированные дифракционные микрообъекты «светящаяся точка» разработаны и изготовлены методами электронно-лучевой литографии в пленках хрома. Математическая обработка массива цифровых изображений микрообъектов позволяет восстанавливать ФРТ микрообъективов и строить как аксиальные, так и трансверсальные сечения каустик.

1. Компьютерная цитофотометрия / Л.В. Омельянчук, Е.И. Пальчиков, Е.С. Смирнов, Н.В. Каманина // Оптико-информационные измерительные и лазерные технологии и системы: юбилейный сборник избранных трудов Конструкторско-технологического института научного приборостроения Сибирского отделения Российской академии наук. − Новосибирск: ГЕО, 2012. – С. 375–398.
2. Особенности применения цифровых камер для цитофотометрического определения количества ДНК в ядрах клеток / И.Г. Пальчикова, Л.В. Омельянчук, Е.И. Пальчиков, Е.С. Смирнов, В.Ф. Семешин // Датчики и системы. – 2012. – № 3. – С. 2–12.
3. Агроскин Л.С., Папаян Г.В. Цитофотометрия. Аппаратура и методы анализа клеток по светопоглощению. – Л.: Наука, 1977. – 295 с.
4. Puech M., Giroud F. Standardisation of DNA quantitation by image analysis: quality control of instrumentation // Cytometry. – 1999. – Vol. 36, iss. 1. – P. 11–17.
5. Пальчикова И.Г., Омельянчук Л.В., Смирнов Е.С. О влиянии дифракции на результаты количественной цитофотометрии // Автометрия. – 2012. – Т. 48, № 6. – С. 92–101.
6. Sarder P., Nehorai A. Deconvolution methods for 3-D fluorescence microscopy images // IEEE Signal Processing Magazine. – 2006. – Vol. 23, iss. 3. – P. 32–45.
7. Kontoyannis N.S., Lanni F. Measured and computed point spread functions for an indirect water immersion objective used in three-dimensional fluorescence microscopy // Three-Dimensional Microscopy: Image Acquisition and Process III: Proceedings SPIE, 10 April 1996. – San Jose, California, 1996. – Vol. 2655. – P. 34–42.
8. Lanni F. Sampling theorem for square-pixel image data / F. Lanni, G. Baxter // Biomedical Image Processing and Three-dimentional Microscopy. Proceedings of the Society of Photo-Optical Instrumentation Engineers, February 09, 1992. – San Jose, California, 1992. – Vol. 1660. – P. 140–147.
9. Scientific volume imaging [Electronic resource]: website. – URL: http://www.svi.nl/ (accessed: 20.11.2014).
10. Vonesch C., Cristofani R.T., Schmit G. Deconvolutionlab: 3D deconvolution package for microscopic images [Electronic resource]. – Switzerland: EPFL: Biomedical Image Group (BIG), version 14.02.2014. – URL: http://bigwww.epfl.ch/algorithms/deconvolutionlab/ (accessed: 20.11.2014).